2021年中考生物知识点之:分离土壤中分解尿素的微生物
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分离土壤中分解尿素的微生物
1.筛选菌株
原则:
人为提供有利于目的菌生长的条件,同时抑制或阻止其他微生物的生长。
培养基的成分:
尿素作为惟一的氮源(选择培养基、固体培养基)。
2.菌落培养和计数
对照:
将不接种的培养基置于相同温度恒温箱培养,目的是证实培养基是否被杂菌污染(或灭菌是否彻底)。
统计菌落数目的方法:
(1)显微镜直接计数法
利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积样品中微生物数量。缺点是不能区分死菌与活菌。
(2)间接计数法(活菌计数法)
①原理:
当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②计算公式:
每克样品中的菌株数=(C÷V)×M,其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。
③操作:
设置重复组,增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数(个人认为,浙科版认为每个培养皿中有20个以内菌落,目的是分离,然后培养得到较大的菌落)。
3.菌种的鉴定
方法:
检测培养基pH的变化判断,用酚红指示试剂来鉴别,菌落周围有红色环带。
原理:
在细菌分解尿素时,分泌的脲酶将尿素分解为氨,氨使培养基碱性增高,pH升高,使酚红呈红色(红色环带)。
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